Nouveaux dérivés de sydnone, utiles notamment
comme anti-inflammatoires. et antibiotiques.,
et leur procédé de préparation.
La patente invention concerne des dérivée de sydnone et leur procédé de préparation. Plus particulièrement, l'invention concerne de nouveaux composés doués d'activités intéressantes et répondant à la formule générale :
<EMI ID=1.1>
dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou d'halogène ou un groupe alkyle
<EMI ID=2.1>
nitro, ces.substituants pouvant être identiques ou différents.
Les halogènes représentés par R ou substituants des noyaux aromatiques Ar sont le fluor, le chlore, le brome et l'iode; dans le cas de R, mais pas comme substituant de Ar, on préfère le brome.
Les groupes alkyle représentés par R ét comme substituants de Ar sont les broupes méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, sec-butyle, tertiobutyle, pentyle, néo..pentyle, hexyle, isohexyle, heptyle
<EMI ID=3.1>
inclus.
Les groupes alkylène. représentés par Alk sont des groupes
<EMI ID=4.1>
<EMI ID=5.1>
sont des groupes de formule alkyl-0- dans laquelle le groupe alkyle est tel que défini ci-dessus.
Le point de fixation des groupes représentés par Ar n'est pas capital et la position relative des substituants éventuels dans ces noyaux,
<EMI ID=6.1> fixation du noyau phényle ou naphtyle et également entre eux en cas de
<EMI ID=7.1>
matiques puissent contenir plus d'un substituant, qui peuvent être identiques ou différents, on préfère qu'il y ait moins de quatre substituants.
On prépare les composés de l'invention en chauffant une amine
de formule :
<EMI ID=8.1>
<EMI ID=9.1>
<EMI ID=10.1>
<EMI ID=11.1>
<EMI ID=12.1>
carbonate de potassium ou l'hydroxyde de sodium et l'alcool tertiobutylique par le tétrahydrofuranne ou l'alcool éthylique si on le désire. On transforme l'amino-acide résultant de formule
<EMI ID=13.1>
en composé N-nitroso par mise en contact avec un agent de nitrosation tel:
que le nitrite de sodium et l'acide chlorhydrique dans un milieu solvant comprend l'eau et un solvant inerte (par exemple dichlorométhane, éther
ou tétrahydrofuranne), ou le chlorure de nitrosyle dans un solvant inerte
(par exemple pyridine ou acide acétique contenant un sel d'acide acétique) ou
<EMI ID=14.1>
ou le bioxyde d'azote dans l'acide acétique ou le tétrachlorure de carbone et un sel d'acide acétique. Les conditions de réaction pour les deux premiers
<EMI ID=15.1>
de nitrosation est utilisé à 60-80[deg.]C pendant 4 à 12 heures et le quatrième au-dessous de 0[deg.]C pendant 4 à 12 heures. Pour le premier agent de nitrosation, des temps de réaction prolongés, des températures de réaction plus élevées un excès de nitrite de sodium et/eu le remplacement de l'acide chlorhydrique par l'acide acétique peuvent provoquer l'oxydation du groupe thio éventuel en groupe sulfoxyde. A partir d'un acide N-nitroso-aminé de formule
<EMI ID=16.1>
dans laquelle R', Alk, Z, x et Ar sont tels que définis ci-dessus, on obtient la sydnone correspondante de formule
<EMI ID=17.1>
dans laquelle R',Alk, Z, x et Ar sont tels que définis ci-dessus, par contact avec un agent de cyclisation tel qu'un anhydride d'acide carboxylique ( de préférence l'anhydride acétique) en atmosphère d'azote à la température ambiante pendant 4 à 5 jours ou à 50-70[deg.]C pendant une heure; ou des chlorures d'acyle, des chloroformiates d'alkyle, des chlorures d'alkyl- ou arylsulfinyles, des alkyl- ou arylcarbodiimides, le phosgène ou l'oxychlorure de phosphore en solution aqueuse à pH 5-7 à 0-40[deg.]C pendant 1 à 4 heures;
ou le cyanate de phényle dans un solvant inerte par exemple le toluène ou dioxane à la température du reflux pendant environ 1 heure.
Si on le désire, on peut transformer les sydnones selon l'invention du type sulfure, c'est-à-dire celles qui répondent à la formule
<EMI ID=18.1>
.�
<EMI ID=19.1>
<EMI ID=20.1>
<EMI ID=21.1> l'on double la quantité de periodate et on augmente la température et le temps de réaction à 25[deg.]C et 4 jours.
Une exception au procédé précédent est la préparation des halogéno-4 sydnones de formule
<EMI ID=22.1>
dans laquelle Alk, Z, Ar et x sont tels que définis ci-dessus ,
que l'on effectue par mise en contact des sydnones non substituées en 4 avec l'halogène et l'acide acétique en présence d'acétate de potassium.
'On peut préparer les amines de formule IIlorsque Alk est
le groupe éthylène en traitant un composé de formule Ar(CH2)xSH avec l'éthylèneimine. On peut encore, mais sans limitation de Alk au groupe éthylène,préparer les amines de formule lien traitant un composé de formule
<EMI ID=23.1>
comme solvant.un alcool tel que méthanol, éthanol ou tertiobutanol.
Dans les formules ci-dessus Ar, Alk, x et Z sont tels que définis précédemment.
Les composés selon l'invention sont utiles en raison de leurs propriétés biologiques intéressantes. Une propriété particulièrement intéressante caractéristique des composés de l'invention est leur activité antiinflammatoire. Les composés sont également antibiotiques, par exemple ils sont efficaces contre des bactéries telles que Bacillus subtilis et
<EMI ID=24.1>
cillium alboatrum et des algues telles que Chlorella vulgaris.
L'utilité des composés de l'invention comme anti-inflammatoires
est évidente dans les résultats d'un essai normalisé pour cette propriété
décrit ci-après :
- On détermine l'aptitude des composés à inhiber la formation de tissu de granulome induite par l'implant de coton chez des rats adrénalectomisés. Ce mode opératoire est une variante de celui- décrit par Dulin dans Proc.
Soc. Exp.Biol. Med., 90, p. 115 (1955). Des rats mâles de race Sprague-Dawley pesant 180-220 � sont adrénalectomisés et on remplace ensuite leur eau
<EMI ID=25.1>
nant en outre pendant les premières 24 heures du glucose en quantité suffi- <EMI ID=26.1>
ment par voie sous-cutanée bilatéralement dans la région pectorale et .dorsale latérale du cou de chaque animal quatre boulettes ,de coton dentaire de 5 à 7 mg chacune,après quoi on administre par voie intragastrique ou sous-cutanée à chacun de 3 à 6 animaux la dose prescrite (initialement
20 mg par voie intragastrique) du composé à essayer dissous ou en suspen'sion dans un véhicule consistant en 0,5 ml d'huile de mars ou d'un mélange de 20 ml d'eau �alée à 0,86% avec une goutte de Polysorbate 80. On utilise comme groupe témoin un groupe identique d'animaux auxquels on a administré de manière identique le véhicule seul. On répète ce traitement le jour suivant. Le jour d'après on sacrifie les animaux et on dissèque, on sèche et
on pèse les pastilles de coton avec le tissu de granulome associé. On considère un composé comme anti-inflammatoire si le poids moyen de tissu granulomateux dans le groupe d'animaux traités, ajusté pour compenser les variations de la technique de dissection est inférieur de manière signi-
<EMI ID=27.1>
Un autre moyen de mise en évidence de l'utilité antiinflammatoire des composés de l'invention est fourni par les résultats d'un essai normalisé concernant leur capacité à inhiber l'oedème induit chez les rats par l'injection de carragheenine. Le mode opératoire est
une variante de celui décrit par Winter et col. Proc. Soc. Exp. Biol. Med.,
<EMI ID=28.1>
gastrique, en diesolution ou suspension dans 0,5 ml de solution aqueuse à . 0,86% de chlorure de sodium, de propylèneglycol ou de leurs mélanges ou
<EMI ID=29.1>
à 130 g. On administre de manière identique le véhicule seul à un groupe identique de rats servant comme groupe témoin. Exactement une heure plus tard, on injecte à chaque animal sous la'surface plantaire de chaque patte de derrière 0,1 ml d'une solution aqueuse à 1% de carragheenine (de la
<EMI ID=30.1>
anti-ir.flammatoire si la circonférence totale T des deux pieds de derrière dans le groupe traité, mesurée en unité arbitraire,' 5 heures après
l'injection de carrageenine est inférieure de manière significative ( P��,05) à la valeur correspondante C pour le groupe témoin.
On peut encore mettre en évidence l'utilité anti-inflammatoire
des composés de l'invention par les résultats d'un essai normalisé concernant:
leur aptitude à inhiber l'oedème induit chez les rats par l'injection de <EMI ID=31.1>
par Pearson et col. Dans Arthritis Rheumat., 2, p. 440 (1950)est le suivant. On distribue de manière aléatoire des rats mâles intacts de souche Spraque-
<EMI ID=32.1>
chaleur sèche (Difco 0640-33) en suspension dans 0,05 ml d'huile de paraffine contenant 2% de digitonine puis on lui administre par voie intragastrique
ou sous-cutanée la dose prescrite du composé (initialement 5 mg) en solution ou suspension dans un véhicule consistant en 0,2 ml d'huile de mais
ou d'un mélange de 20 ml de solution aqueuse à 0,85% de chlorure de sodium avec une goutte de Polysorbate 80. On répète ainsi l'administration du composé journellement pendant les 18'jours conséquentifs suivants. On administre de manière identique le véhicule seul aux animaux du groupe témoin. Le 20ème jour on sacrifie les rats et on mesure en unités arbitraires
<EMI ID=33.1>
anti-inflammatoire si le volume moyen du pied de derrière dans le groupe traité
<EMI ID=34.1>
le groupe témoin..
La (P-phénylthioéthyl)-3 sydnone s'est révélée anti-inflammatoire à 1 mg par voie intragastrique dans le premier et le troisième des essais précédents et à 10 mg par voie sous-cutanée dans le deuxième essai.
On peut montrer l'activité antibiotique des composés selon l'invention par les résultats des essais normalisés décrits ci-après.
Pour mettre en évidence l'activité antibactérienne des composés de l'inven-
<EMI ID=35.1>
gical laboratoriea ou par la société Difco) à la concentration double de
<EMI ID=36.1>
<EMI ID=37.1>
on chauffe le composé dans l'eau distillée stérile à une concentration de
<EMI ID=38.1>
en conditions aérobics à 37[deg.]C un mélange à volumes égaux de cette préparation du composé et du bouillon inoculé et ensuite on examine approximativement la croissance de l'organisme d'essai. La période d'incubation est de 20-24 heures
<EMI ID=39.1>
de l'organisme d'essai, le composé est considéré comme inactif. Si l'on n'observe
<EMI ID=40.1>
avec un bouillon inoculé de même composition que ci-dessus <EMI ID=41.1>
<EMI ID=42.1>
<EMI ID=43.1>
<EMI ID=44.1>
<EMI ID=45.1>
<EMI ID=46.1>
laquelle on ne discerne pas de croissance de l'organieme d'essai. Les témoins sont fournie par des incubatiors concurrentes identiques, mais en l'absence du composé.
Pour mettre en évidence l'activité antifongique des composés
de l'invention, on prépare deux concentrations de gélose au dextrose de Sabouraud (fabriqué par la société Baltimore Biological Laboratories ou par
<EMI ID=47.1>
et l'autre a la concentration double. On stérilise ces préparations et on
<EMI ID=48.1>
dans l'eau distillée stérile à une concentration de 200 y/ml à une température
<EMI ID=49.1>
préparation du composé et de la gélose a concentration double et on mélange avec la gélose à concentration normale en quantités telles que l'on obtienne
<EMI ID=50.1>
On laisse refroidir et solidifier les mélanges ainsi obtenus après quoi
on les�inocule en surface avec une suspension de T. mentagrophytes, C. albicans, Fusarium sp. ou V. albo-atrum et ensuite on incube en conditions aérobies à la température ambiante. La durée d'incubation est de 6-7 jours pour
T. mentagrophytes, 4 heures pour C.albicans, et 5-7 !ours pour Fusrium sp.
et V. albo-atrum. L'activité est déterminée par un examen grossier et le pouvoir antifongique est exprimé par la concentration minimale à laquelle
on ne discerne pas de croissance de l'organisme d'essai. Les témoins sont fournis par des incubations identiques à l'exception de l'absence du composé.
L'activité algistatique des composés de l'invention est mise
en évidence par leur aptitude à empêcher la croissance de Chlorella vulgaris. Dans cet essai, on prépare un milieu nutritif consistant en 0,25 g de nitrate
de sodium, 0,025 g de chlorure de calcium, 0,175 g de phosphate monopotassique, 0,075 g de phosphate dipotassique, 0,075 g de sulfate de magnésium, U,025 g
<EMI ID=51.1>
<EMI ID=52.1>
un mélange de sol et d'eau distillée et en séparant les solides insolubles 4:
<EMI ID=53.1>
composé dans l'eau distillée stérile à une concentration de 2000 y/mi
et à une température de 80[deg.]C pendant 20 mn. On fait incuber en conditions aérobies à la température ambiante un mélange à volumes égaux du milieu inoculé et de la préparation du composé sous irradition constante pendant
4 à 7 jours et ensuite on examine grossièrement pour déterminer la croissance de l'organisme d'essai.. Si l'on observe cette croissance, ce composé est considéré comme inactif. Si l'on n'observe pas de croissance,le mélange incubé est dilué en série et mélangé avec un milieu inoculé de même composition que décrit: ci-dessus,sauf qu'il est ajusté à un volume de
1000 ml au lieu de 500 et que l'on y incorpore 1% en colume de la culture
<EMI ID=54.1>
<EMI ID=55.1>
On fait incuber les mélanges ainsi obtenus comme précédemment et on les examine grossièrement pour évaluer la croissance de l'orgenisme d'essai. Le pouvoir algistatique est exprimé par la concentration minimale à laquelle on n'observe pas de croissance de l'organisme d'essai. Les témoins sont 'fournis par des incubations concurrentes identique;) aux précédentes à l'exception de l'absence du composé.
L'homme de: l'art reconnaîtra facilement que les observations d'activité dans les essais normalisés pour les activités biologiques particulières sont fondamentales pour la mise au point de nouveaux médicaments
<EMI ID=56.1>
les composés algistatiques sont appropriés pour le conditionnement de l'eau d'alimentation de chaudières, etc.
Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois en limiter la portée. Dans ces exemples les quantités relatives de substance sont en parties en poids sauf indication contraire. Les rapports entre parties
<EMI ID=57.1>
d'absorption dans l'infrarouge sont déterminés en solution chloroformique et
<EMI ID=58.1>
en solution chloroformique à une concentration de 1% en poids à la tempé-
<EMI ID=59.1>
Préparation des produits de départ
<EMI ID=60.1>
<EMI ID=61.1>
thioéthylamine, 12 parties de cyanure de sodium, 22 parties de formaldéhyde
<EMI ID=62.1>
et ensuite on dilue par 450 parties de benzène. On sépare la couche benzé-
<EMI ID=63.1>
On dissout le résidu huileux résultant dans le méthanol. On ajoute du chlorure d'hydrogène dissous dans le propanol-2 en quantité juste suffisante pour acidifier le mélange et on sépare le précipité résultant par filtration et on le sèche pour obtenir le chlorhydrate de N-(�-phénylthioéthyl)-glycinonitrile, F. environ 125-126[deg.]C.
: On chauffe à l'ébullition au reflux pendant 5 heures un mélange de 31 parties du produit obtenu au paragraphe précédent avec 86 parties d'hydroxyde de baryum, 360 parties d'eau et environ 350 parties de méthanol
<EMI ID=64.1>
phénylthioéthyl)-glycinate de baryum, F. 193-196[deg.]C après recristallisation dans l'eau.
<EMI ID=65.1>
<EMI ID=66.1>
du produit obtenu au paragraphe précédent et ensuite on introduit 14 parties d'acide' chlorhydrique concentré. On ajoute encore 14 parties de nitrite de sodium par portions en agitant à 0[deg.]C en 4 heures, après quoi on poursuit l'agitation pendant encore 15 heures à 0-5[deg.]C. On filtré le mélange résultant on extrait le filtrat par\le dichlorométhane et on lave l'extrait à l'eau et on l'extrait à nouveau par le bicarbonate de sodium aqueux saturé. On acidifie l'extrait au bicarbonate par l'acide chlorhydrique concentré et on extrait
le mélange résultant par le dichlorométhane. L'évaporation du solvant de
<EMI ID=67.1>
<EMI ID=68.1>
ties de méthylate de sodium et 625 parties d'alcool tertiobutylique puis on le fait refroidir. On sépare par filtration le solide insoluble, on le
<EMI ID=69.1>
On chauffe au reflux,pendant 15 heures, un mélange de 35 parties de �-(phénylthio)-éthylamine, 35 parties d'acide bromo-2 propionique, 16 parties de carbonate de potassium et 360 parties de tétrahydrofuranne. On refroidit ensuite le mélange de réaction à la température ambiante et on sépare par filtration le solide insoluble, on le lave à l'eau et on le sèche à l'air
<EMI ID=70.1>
On chauffe au reflux pendant 20 heures un mélange de 35 parties de �-(phénylthio)-éthylamine, 49 parties d'acide a-bromophénylacétique, 9 parties d'hydroxyde de sodium et 315 parties d'éthanol, puis on le refroidit. On sépare par filtration le solide insoluble, on le lave à l'hexane et on le <EMI ID=71.1>
F. environ 205-206[deg.]C.
Exe le E
<EMI ID=72.1>
<EMI ID=73.1>
250 parties d'eau et 214 parties de dichlorométhane et ensuite on introduit
50 parties d'acide chlorhydrique concentré. Ensuite, on ajoute encore par portions en agitant 12 parties de nitrite de sodium en 4 heures à 0[deg.]C après quoi on poursuit l'agitation à 0-5[deg.]C pendant 15 heures. On filtre le mélange résultant on extrait le filtrat par le dichlorométhane et on lave l'extrait à l'eau et ensuite on extrait par le bicarbonate de sodium saturé. On acidifie l'extrait au bicarbonate par l'acide chlorhydrique et on extrait
le mélange résultant par le dichlorométhane. L'évaporation du dichlorométhane
<EMI ID=74.1>
Pour les deux derniers composés, la nitrosation du groupe
<EMI ID=75.1>
<EMI ID=76.1>
24 parties d'acide chlorhydrique concentré, 350 parties d'eau et 535 parties
<EMI ID=77.1>
14 parties de nitrite de sodium dans 50 parties d'eau. On continue l'agitation
<EMI ID=78.1> . la ;.hase aqueuse et on l'extrait, par le dichlorométhane. On combina l'extrait avec la phase organique du mélange de réaction et on lave la solution résultante par l'eau et ensuite on extrait au bicarbonate de sodium aqueux saturé. On acidifie l'extrait au bicarbonate et on extrait le mélange résultant par le dichlorométhane. L'évaporation du dichlorométhane de l'extrait donne
<EMI ID=79.1>
N-nitrosoalanine.
Exemple G
<EMI ID=80.1>
on ajoute lentement une solution de 18 parties dé nitrite de sodium dans
20 parties d'eau. On continue l'agitation pendant 2 heures,puis on verse le mélange réactionnel dans l'eau. On extrait le mélange résultant par le dichlorométhane et on lave l'extrait à l'eau et on extrait ensuite par
le bicarbonate aqueux saturé. On acidifie l'extrait au bicarbonate par l'acide chlorhydrique concentré et on l'extrait à son tour par le dichlorométhane. Par évaporation du solvant de cet extrait, on obtient comme
<EMI ID=81.1>
alanine avec le nitrite de sodium selon le mode opératoire ci-dessus, la nitrosation et l'oxydation ont lieu toutes deux et le produit obtenu est
<EMI ID=82.1>
Préparation des produits de l'invention
Exemple
On maintient à la température ambiante sous atmosphère d'azote
<EMI ID=83.1> dans 500 parties d'eau. On agite le mélange résultant pendant 2 heures à la température ambiante,puis on l'extrait par le dichlorométhane. On lave successivement l'extrait par l'eau, le bicarbonate de sodium aqueux saturé et l'eau et on évapore ensuite le solvant sous pression réduite. Le résidu résultant
<EMI ID=84.1>
maximum d'absorption dans l'infrarouge à environ 1745 cm et des maxima
<EMI ID=85.1>
<EMI ID=86.1>
<EMI ID=87.1>
En répétant le procédé de l'exemple 1 et en utilisant le composé nitroso approprié comme produit de départ, on obtient les produits suivants :
<EMI ID=88.1>
phénylt:hio)-éthyl/-3 méthyl-4 sydnone; maximum d'absorption dans l'infrarouge à environ 1748 cm maxima d'absorption dans l'ultraviolet à environ
<EMI ID=89.1>
<EMI ID=90.1>
<EMI ID=91.1>
l'infrarouge à environ 1743 cm , maxoma d'absorption dans l'ultraviolet
<EMI ID=92.1>
<EMI ID=93.1>
un mélange acétone-éther.
<EMI ID=94.1>
dans environ 75 parties d'un mélange méthanol-eau 1 : 2 en vulume. On sépare les solides insolubles par filtration et on lave au chloroforme. On combine le filtrat et les liqueurs de lavage et on lave à l'eau la solution résultante et on évapore le solvant sous pression réduite pour
<EMI ID=95.1>
après recristallisation dans un mélange acétone-éther. En faisant réagir le produit de départ approprié avec le periodate de sodium selon le
<EMI ID=96.1>
<EMI ID=97.1>
<EMI ID=98.1> ....
<EMI ID=99.1>
<EMI ID=100.1>
solides insolubles par filtration et on les lave au chloroforme. On réunit
<EMI ID=101.1>
l'eau et ensuite on évapore le solvant nous pression réduite pour obtenir
<EMI ID=102.1>
recristallisation dans l'acétone. En répétant le mode opératoire ci-dessus avec les produits de départ appropriés on obtient les produits suivante :
<EMI ID=103.1>
<EMI ID=104.1>
<EMI ID=105.1>
sydnone et 40 parties d'acétate de potassium dans 420 parties d'acide acétique, on ajoute lentement en agitant une solution à 28 parties de brome dans 105 parties d'acide acétique. On continue l'agitation jusqu'à ce que le mélange de réaction devienne incolore après quoi on délaie le mélange dans 500 parties d'eau. On sépare le précipité formé par filtration et on le recristallise
<EMI ID=106.1>
sydnone, F. environ 86-88[deg.]C.
Exemple
<EMI ID=107.1>
N-nitrosoalanine dans 50 parties d'eau contenant 1,3 partie. d'hydroxyde de
<EMI ID=108.1> <EMI ID=109.1>
cyanate de phényle dans 30 parties de toluène. On sépare le solvant sous pression réduite et on agite le résidu pendant 12 heures avec 300 parties d'hydroxyde de sodium aqueux N, puis on filtre et.on lave à l'eau pour
<EMI ID=110.1>
60-61[deg.]C, après chromacog.raphie sur alumine neutre et recristallisation dans l'éther.
En répétant le mode opératoire ci-dessus avec le composé nitroso approprié comme produit de départ on obtient les produits suivants :
<EMI ID=111.1>
Les composés de l'invention sont en général des solides blancs ou jaune clair non hygroscopiques et stables à la température. Les composés de formule I sont solubles dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et insolubles dans l'eau, le pentane et l'hexane.
On décrit ci-dessous des compositions pharmaceutiques caractéristiques contenant les composés de l'invention adaptées pour l'administration orale. D'autres formes pharmaceutiques appropriées convenant à l'administration orale de ces composés comprennent les pastilles, draguée, pilules, poudres, solutions, suspensions, sirops et émulsions.
Préparation de tablettes
'TABLETTE A
<EMI ID=112.1>
TABLETTE B
<EMI ID=113.1>
On dissout l'ingrédient actif pour la préparation de la tablette A ) dans un mélange alcool isopropylique-eau et on disperse la solution sur du
lactose. On sèche le mélange à l'air et on le passe au tamis de 0,42 mm d'ouverture de mailles. On granule ensuite le mélange avec de l'alcool isopropylique, on étale sur des plateaux et on sèche à 49[deg.]C pendant 16 heures.
On tamise ensuite le produit granulé séché. On mélange les granules énergique-
<EMI ID=114.1>
On traite l'ingrédient actif dans la préparation de la tablette B de manière identique à celui de la tablette A jusqu'au séchage à 49[deg.]C pendant
16 heures. Ensuite, on tamise les granulea séchés et on les mélange énergiquement avec du stéarate de magnésium et on presse le mélange en tablettes.
CAPSULE A
<EMI ID=115.1>
<EMI ID=116.1>
<EMI ID=117.1>
:5 On mélange l'ingrédient actif de la capsule A ou B énergiquement
avec l'amidon de mais et le lactose, on passe au tamis de 0,44 mm et on mélange à nouveau. On ajoute le talc et on mélange énergiquement le mélange et on en remplit des capsules de gélatine dure appropriées à la main ou la machine
<EMI ID=118.1>
<EMI ID=119.1>
formulations de ce type, on peut citer les sucres tels que lactose, saccharose, mannitol ou sorbitol; les amidons tels que l'amidon de mars, de tapioca ou de pomme de terre; les dérivés de cellulose tels que carboxyméthylcellulose de sodium, éthylcellulose ou méthylcellulose, la gélatine, les phosphates de
15 calcium tels que phosphate dicalcique ou tricalcique, le sulfate de sodium,
le sulfate de calcium, la polyvinyl pyrrol idone, l'alcool polyvinylique les acides stéariques, les stéarates de métaux alcalino-terreux tels que le stéarate de magnésium; les huiles végétales contenant de l'acide stéarique, telles
que l'huile d'arachide, l'huile de grainesde coton, l'huile de sésame, l'huile d'olive, l'huile de mars; les agents tensio-actifs (non ioniques, cationiques ou anioniques), les polymères d'éthylèneglycol, la �-cyclodextrine, les alcools gras, les solides de céréales hydrolysés,ainsi que d'antres chargea,liants, désagrégeants, lubrifiants compatibles non toxiques couramment utilisée dans les formultations pharmaceutiques.
Dans les compositions du type décrit ci-dessus, les nouveaux composés de formule sont présents en quantité propre à produire l'effet désiré. Bien qu'une quantité d'environ 100 à 250 mg par dose unitaire soit couvent convenable, on peut incorporer si on le désire, beaucoup plus ou beau-
<EMI ID=120.1>
lière de ces composés dépend de divers factaurs tels que le composé particulier utilisé, l'état pour lequel il est administré, et la réponse individuelle du patient. Des doses caractéristiques pour l'utilisation comme
<EMI ID=121.1>
New derivatives of sydnone, useful in particular
as anti-inflammatory drugs. and antibiotics.,
and their method of preparation.
The patent relates to sydnone derivatives and their preparation process. More particularly, the invention relates to new compounds endowed with interesting activities and corresponding to the general formula:
<EMI ID = 1.1>
in which R is a hydrogen or halogen atom or an alkyl group
<EMI ID = 2.1>
nitro, these.substituants may be the same or different.
The halogens represented by R or substituents of the aromatic rings Ar are fluorine, chlorine, bromine and iodine; in the case of R, but not as a substituent of Ar, bromine is preferred.
The alkyl groups represented by R and as substituents of Ar are methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, pentyl, neo..pentyl, hexyl, isohexyl, heptyl
<EMI ID = 3.1>
included.
Alkylene groups. represented by Alk are groups
<EMI ID = 4.1>
<EMI ID = 5.1>
are groups of the formula alkyl-O- in which the alkyl group is as defined above.
The point of attachment of the groups represented by Ar is not essential and the relative position of the possible substituents in these rings,
<EMI ID = 6.1> fixation of the phenyl or naphthyl ring and also between them in case of
<EMI ID = 7.1>
matics may contain more than one substituent, which may be the same or different, it is preferred that there are less than four substituents.
The compounds of the invention are prepared by heating an amine
of formula:
<EMI ID = 8.1>
<EMI ID = 9.1>
<EMI ID = 10.1>
<EMI ID = 11.1>
<EMI ID = 12.1>
potassium carbonate or sodium hydroxide and tert-butyl alcohol with tetrahydrofuran or ethyl alcohol if desired. The resulting amino acid of formula
<EMI ID = 13.1>
as an N-nitroso compound by contacting with a nitrosating agent such as:
that sodium nitrite and hydrochloric acid in a solvent medium includes water and an inert solvent (e.g. dichloromethane, ether
or tetrahydrofuran), or nitrosyl chloride in an inert solvent
(e.g. pyridine or acetic acid containing a salt of acetic acid) or
<EMI ID = 14.1>
or nitrogen dioxide in acetic acid or carbon tetrachloride and a salt of acetic acid. The reaction conditions for the first two
<EMI ID = 15.1>
of nitrosation is used at 60-80 [deg.] C for 4 to 12 hours and the fourth below 0 [deg.] C for 4 to 12 hours. For the first nitrosating agent, prolonged reaction times, higher reaction temperatures, excess sodium nitrite and / or replacement of hydrochloric acid by acetic acid can cause oxidation of the eventual thio group to sulfoxide group. From an N-nitroso-amino acid of formula
<EMI ID = 16.1>
in which R ', Alk, Z, x and Ar are as defined above, we obtain the corresponding sydnone of formula
<EMI ID = 17.1>
in which R ', Alk, Z, x and Ar are as defined above, by contact with a cyclization agent such as a carboxylic acid anhydride (preferably acetic anhydride) in a nitrogen atmosphere at room temperature for 4-5 days or 50-70 [deg.] C for one hour; or acyl chlorides, alkyl chloroformates, alkyl- or arylsulfinyl chlorides, alkyl- or arylcarbodiimides, phosgene or phosphorus oxychloride in aqueous solution at pH 5-7 at 0-40 [deg .] C for 1 to 4 hours;
or phenyl cyanate in an inert solvent, for example toluene or dioxane at reflux temperature for about 1 hour.
If desired, the sydnones according to the invention can be transformed into the sulphide type, that is to say those which correspond to the formula
<EMI ID = 18.1>
. �
<EMI ID = 19.1>
<EMI ID = 20.1>
<EMI ID = 21.1> the quantity of periodate is doubled and the temperature and the reaction time are increased to 25 [deg.] C and 4 days.
An exception to the above process is the preparation of the 4-halogenosynones of formula
<EMI ID = 22.1>
in which Alk, Z, Ar and x are as defined above,
which is carried out by contacting the unsubstituted sydnones in 4 with halogen and acetic acid in the presence of potassium acetate.
'The amines of formula II can be prepared when Alk is
the ethylene group by treating a compound of the formula Ar (CH2) xSH with ethyleneimine. It is also possible, but without limitation of Alk to the ethylene group, to prepare amines of formula bond treating a compound of formula
<EMI ID = 23.1>
as solvent.an alcohol such as methanol, ethanol or tert-butanol.
In the above formulas Ar, Alk, x and Z are as defined above.
The compounds according to the invention are useful on account of their valuable biological properties. A particularly advantageous property characteristic of the compounds of the invention is their anti-inflammatory activity. The compounds are also antibiotics, for example they are effective against bacteria such as Bacillus subtilis and
<EMI ID = 24.1>
cillium alboatrum and algae such as Chlorella vulgaris.
The usefulness of the compounds of the invention as anti-inflammatories
is evident in the results of a standardized test for this property
described below:
The ability of the compounds to inhibit the formation of granuloma tissue induced by the cotton implant in adrenalectomized rats is determined. This procedure is a variation of that described by Dulin in Proc.
Soc. Exp.Biol. Med., 90, p. 115 (1955). Male Sprague-Dawley rats weighing 180-220 � are adrenalectomized and their water is then replaced
<EMI ID = 25.1>
in addition during the first 24 hours sufficient glucose <EMI ID = 26.1>
subcutaneously bilaterally in the pectoral and lateral dorsal region of the neck of each animal four pellets, of dental cotton of 5 to 7 mg each, after which is administered intragastrically or subcutaneously to each of 3 to 6 animals the prescribed dose (initially
20 mg intragastrically) of the test compound dissolved or suspended in a vehicle consisting of 0.5 ml of mars oil or a mixture of 20 ml of water (0.86) % with a drop of Polysorbate 80. As a control group, an identical group of animals to which the vehicle alone has been administered identically. This treatment is repeated the following day. The next day we sacrifice the animals and dissect, dry and
the cotton pellets are weighed with the associated granuloma tissue. A compound is considered to be anti-inflammatory if the average weight of granulomatous tissue in the group of treated animals, adjusted to compensate for variations in the dissection technique, is significantly lower.
<EMI ID = 27.1>
Another means of demonstrating the anti-inflammatory utility of the compounds of the invention is provided by the results of a standardized test concerning their capacity to inhibit the edema induced in rats by the injection of carrageenan. The operating mode is
a variant of that described by Winter et al. Proc. Soc. Exp. Biol. Med.,
<EMI ID = 28.1>
gastric, in diesolution or suspension in 0.5 ml of aqueous solution. 0.86% sodium chloride, propylene glycol or their mixtures or
<EMI ID = 29.1>
at 130 g. Vehicle alone was administered identically to an identical group of rats serving as a control group. Exactly one hour later, each animal was injected under the plantar surface of each hind paw 0.1 ml of a 1% aqueous solution of carrageenan (from
<EMI ID = 30.1>
anti-inflammatory if the total circumference T of the two hind feet in the treated group, measured in arbitrary units, '5 hours later
the injection of carrageenin is significantly lower (P � �.05) than the corresponding C value for the control group.
We can still highlight the anti-inflammatory utility
of the compounds of the invention by the results of a standardized test concerning:
their ability to inhibit edema induced in rats by injection of <EMI ID = 31.1>
by Pearson et al. In Arthritis Rheumat., 2, p. 440 (1950) is as follows. Intact male rats of the Spraque strain are randomly distributed.
<EMI ID = 32.1>
dry heat (Difco 0640-33) suspended in 0.05 ml of paraffin oil containing 2% digitonin and then administered intragastrically
or subcutaneously the prescribed dose of the compound (initially 5 mg) in solution or suspension in a vehicle consisting of 0.2 ml of corn oil
or a mixture of 20 ml of 0.85% aqueous sodium chloride solution with one drop of Polysorbate 80. The administration of the compound is thus repeated daily for the next 18 days. The vehicle alone was administered in an identical manner to the animals in the control group. On the 20th day the rats are sacrificed and measured in arbitrary units
<EMI ID = 33.1>
anti-inflammatory if the average volume of the hind foot in the treated group
<EMI ID = 34.1>
the control group.
(P-Phenylthioethyl) -3 sydnone was shown to be anti-inflammatory at 1 mg intragastrically in the first and third of the previous trials and at 10 mg subcutaneously in the second trial.
The antibiotic activity of the compounds according to the invention can be shown by the results of the standardized tests described below.
To demonstrate the antibacterial activity of the compounds of the invention
<EMI ID = 35.1>
gical laboratoriea or by the company Difco) at the double concentration of
<EMI ID = 36.1>
<EMI ID = 37.1>
the compound is heated in sterile distilled water to a concentration of
<EMI ID = 38.1>
under aerobic conditions at 37 [deg.] C a mixture of equal volumes of this compound preparation and inoculated broth and then the growth of the test organism is examined approximately. The incubation period is 20-24 hours
<EMI ID = 39.1>
of the test organism, the compound is considered to be inactive. If we do not observe
<EMI ID = 40.1>
with an inoculated broth of the same composition as above <EMI ID = 41.1>
<EMI ID = 42.1>
<EMI ID = 43.1>
<EMI ID = 44.1>
<EMI ID = 45.1>
<EMI ID = 46.1>
which no growth of the test organism was discerned. Controls are provided by competing identical incubators, but in the absence of the compound.
To demonstrate the antifungal activity of compounds
of the invention, two concentrations of Sabouraud dextrose agar (manufactured by the company Baltimore Biological Laboratories or by
<EMI ID = 47.1>
and the other has double concentration. These preparations are sterilized and
<EMI ID = 48.1>
in sterile distilled water at a concentration of 200 y / ml at a temperature
<EMI ID = 49.1>
preparation of compound and double strength agar and mixed with normal strength agar in amounts such as to obtain
<EMI ID = 50.1>
The mixtures thus obtained are allowed to cool and solidify, after which
they are surface inoculated with a suspension of T. mentagrophytes, C. albicans, Fusarium sp. or V. albo-atrum and then incubated aerobically at room temperature. The incubation period is 6-7 days for
T. mentagrophytes, 4 hours for C.albicans, and 5-7! Bears for Fusrium sp.
and V. albo-atrum. The activity is determined by a rough examination and the antifungal power is expressed by the minimum concentration at which
no growth of the test organism is discernible. Controls are provided by identical incubations except for the absence of the compound.
The algistatic activity of the compounds of the invention is put
evidenced by their ability to inhibit the growth of Chlorella vulgaris. In this test, a nutrient medium consisting of 0.25 g of nitrate is prepared
sodium, 0.025 g calcium chloride, 0.175 g monopotassium phosphate, 0.075 g dipotassium phosphate, 0.075 g magnesium sulfate, U, 025 g
<EMI ID = 51.1>
<EMI ID = 52.1>
a mixture of soil and distilled water and separating the insoluble solids 4:
<EMI ID = 53.1>
compound in sterile distilled water at a concentration of 2000 y / mi
and at a temperature of 80 [deg.] C for 20 min. A mixture of equal volumes of the inoculated medium and the preparation of the compound is incubated under aerobic conditions at room temperature under constant irradiation for
4-7 days and then roughly examined for growth of the test organism. If this growth is observed, this compound is considered inactive. If no growth is observed, the incubated mixture is serially diluted and mixed with an inoculated medium of the same composition as described above, except that it is adjusted to a volume of
1000 ml instead of 500 and that we incorporate 1% colume of the culture
<EMI ID = 54.1>
<EMI ID = 55.1>
The mixtures thus obtained are incubated as before and examined roughly to assess the growth of the test organism. The algistatic power is expressed as the minimum concentration at which no growth of the test organism is observed. Controls are provided by concurrent incubations identical to the previous ones except for the absence of the compound.
Those skilled in the art will readily recognize that observations of activity in standardized assays for particular biological activities are fundamental to the development of new drugs.
<EMI ID = 56.1>
algistatic compounds are suitable for conditioning boiler feed water, etc.
The following examples illustrate the invention without, however, limiting its scope. In these examples the relative amounts of substance are in parts by weight unless otherwise indicated. Relations between parties
<EMI ID = 57.1>
absorption in the infrared are determined in chloroform solution and
<EMI ID = 58.1>
in chloroform solution at a concentration of 1% by weight at room temperature
<EMI ID = 59.1>
Preparation of starting materials
<EMI ID = 60.1>
<EMI ID = 61.1>
thioethylamine, 12 parts sodium cyanide, 22 parts formaldehyde
<EMI ID = 62.1>
and then diluted with 450 parts of benzene. The benzene layer is separated
<EMI ID = 63.1>
The resulting oily residue is dissolved in methanol. Hydrogen chloride dissolved in propanol-2 is added in an amount just sufficient to acidify the mixture and the resulting precipitate is filtered off and dried to obtain N - (� -phenylthioethyl) -glycinonitrile hydrochloride. , F. about 125-126 [deg.] C.
: A mixture of 31 parts of the product obtained in the previous paragraph with 86 parts of barium hydroxide, 360 parts of water and about 350 parts of methanol is heated to boiling under reflux for 5 hours.
<EMI ID = 64.1>
barium phenylthioethyl) -glycinate, mp 193-196 [deg.] C after recrystallization from water.
<EMI ID = 65.1>
<EMI ID = 66.1>
of the product obtained in the previous paragraph and then introduced 14 parts of concentrated hydrochloric acid. A further 14 parts of sodium nitrite are added in portions with stirring at 0 [deg.] C over 4 hours, after which stirring is continued for a further 15 hours at 0-5 [deg.] C. The resulting mixture was filtered, the filtrate extracted with dichloromethane and the extract washed with water and extracted again with saturated aqueous sodium bicarbonate. The bicarbonate extract is acidified with concentrated hydrochloric acid and extracted
the resulting mixture with dichloromethane. Evaporation of the solvent from
<EMI ID = 67.1>
<EMI ID = 68.1>
1 parts of sodium methoxide and 625 parts of tert-butyl alcohol and then cooled. The insoluble solid is separated by filtration,
<EMI ID = 69.1>
A mixture of 35 parts of �-(phenylthio) -ethylamine, 35 parts of 2-bromo-propionic acid, 16 parts of potassium carbonate and 360 parts of tetrahydrofuran is refluxed for 15 hours. The reaction mixture is then cooled to room temperature and the insoluble solid is filtered off, washed with water and dried in air.
<EMI ID = 70.1>
A mixture of 35 parts of �-(phenylthio) -ethylamine, 49 parts of a-bromophenylacetic acid, 9 parts of sodium hydroxide and 315 parts of ethanol is refluxed for 20 hours, then it is heated. cools. The insoluble solid is separated by filtration, washed with hexane and <EMI ID = 71.1>
F. about 205-206 [deg.] C.
Exe the E
<EMI ID = 72.1>
<EMI ID = 73.1>
250 parts of water and 214 parts of dichloromethane and then introduced
50 parts of concentrated hydrochloric acid. Then 12 parts of sodium nitrite were added in portions with stirring over 4 hours at 0 [deg.] C after which stirring was continued at 0-5 [deg.] C for 15 hours. The resulting mixture was filtered, the filtrate extracted with dichloromethane and the extract washed with water and then extracted with saturated sodium bicarbonate. The bicarbonate extract is acidified with hydrochloric acid and extracted
the resulting mixture with dichloromethane. Evaporation of dichloromethane
<EMI ID = 74.1>
For the last two compounds, nitrosation of the group
<EMI ID = 75.1>
<EMI ID = 76.1>
24 parts of concentrated hydrochloric acid, 350 parts of water and 535 parts
<EMI ID = 77.1>
14 parts of sodium nitrite in 50 parts of water. We continue the agitation
<EMI ID = 78.1>. the aqueous phase and extracted with dichloromethane. The extract was combined with the organic phase of the reaction mixture and the resulting solution washed with water and then extracted with saturated aqueous sodium bicarbonate. The extract is acidified with bicarbonate and the resulting mixture is extracted with dichloromethane. Evaporation of the dichloromethane from the extract gives
<EMI ID = 79.1>
N-nitrosoalanine.
Example G
<EMI ID = 80.1>
slowly add a solution of 18 parts of sodium nitrite in
20 parts of water. Stirring is continued for 2 hours, then the reaction mixture is poured into water. The resulting mixture is extracted with dichloromethane and the extract is washed with water and then extracted with
saturated aqueous bicarbonate. The bicarbonate extract is acidified with concentrated hydrochloric acid and it is in turn extracted with dichloromethane. By evaporation of the solvent from this extract, one obtains as
<EMI ID = 81.1>
alanine with sodium nitrite according to the above procedure, both nitrosation and oxidation take place and the product obtained is
<EMI ID = 82.1>
Preparation of the products of the invention
Example
Maintained at room temperature under a nitrogen atmosphere
<EMI ID = 83.1> in 500 parts of water. The resulting mixture was stirred for 2 hours at room temperature, then extracted with dichloromethane. The extract is washed successively with water, saturated aqueous sodium bicarbonate and water and the solvent is then evaporated off under reduced pressure. The resulting residue
<EMI ID = 84.1>
maximum absorption in the infrared at about 1745 cm and maximum
<EMI ID = 85.1>
<EMI ID = 86.1>
<EMI ID = 87.1>
By repeating the process of Example 1 and using the appropriate nitroso compound as the starting material, the following products are obtained:
<EMI ID = 88.1>
phenylt: hio) -ethyl / -3 methyl-4 sydnone; maximum infrared absorption at about 1748 cm maximum ultraviolet absorption at about
<EMI ID = 89.1>
<EMI ID = 90.1>
<EMI ID = 91.1>
infrared at about 1743 cm, absorption maxoma in the ultraviolet
<EMI ID = 92.1>
<EMI ID = 93.1>
an acetone-ether mixture.
<EMI ID = 94.1>
in about 75 parts of a 1: 2 methanol-water mixture in vulume. The insoluble solids are separated by filtration and washed with chloroform. The filtrate and the washings are combined and the resulting solution washed with water and the solvent evaporated under reduced pressure to
<EMI ID = 95.1>
after recrystallization from an acetone-ether mixture. By reacting the appropriate starting material with sodium periodate according to the
<EMI ID = 96.1>
<EMI ID = 97.1>
<EMI ID = 98.1> ....
<EMI ID = 99.1>
<EMI ID = 100.1>
insoluble solids by filtration and washed with chloroform. We reunite
<EMI ID = 101.1>
water and then the solvent is evaporated under reduced pressure to obtain
<EMI ID = 102.1>
recrystallization from acetone. By repeating the above procedure with the appropriate starting materials, the following products are obtained:
<EMI ID = 103.1>
<EMI ID = 104.1>
<EMI ID = 105.1>
sydnone and 40 parts of potassium acetate in 420 parts of acetic acid, a solution of 28 parts of bromine in 105 parts of acetic acid is added slowly with stirring. Stirring is continued until the reaction mixture becomes colorless after which the mixture is stirred in 500 parts of water. The precipitate formed is separated by filtration and recrystallized.
<EMI ID = 106.1>
sydnone, F. about 86-88 [deg.] C.
Example
<EMI ID = 107.1>
N-nitrosoalanine in 50 parts of water containing 1.3 parts. hydroxide
<EMI ID = 108.1> <EMI ID = 109.1>
phenyl cyanate in 30 parts of toluene. The solvent is separated off under reduced pressure and the residue is stirred for 12 hours with 300 parts of N aqueous sodium hydroxide, then filtered and washed with water to obtain.
<EMI ID = 110.1>
60-61 [deg.] C, after chromacog.raphie on neutral alumina and recrystallization from ether.
By repeating the above procedure with the appropriate nitroso compound as starting material, the following products are obtained:
<EMI ID = 111.1>
The compounds of the invention are generally white or light yellow solids which are non-hygroscopic and stable at temperature. The compounds of formula I are soluble in acetone and ethyl acetate and insoluble in water, pentane and hexane.
Characteristic pharmaceutical compositions containing the compounds of the invention suitable for oral administration are described below. Other suitable dosage forms suitable for oral administration of these compounds include lozenges, dragees, pills, powders, solutions, suspensions, syrups, and emulsions.
Preparation of tablets
'TABLET A
<EMI ID = 112.1>
TABLET B
<EMI ID = 113.1>
The active ingredient for the preparation of tablet A) is dissolved in isopropyl alcohol-water mixture and the solution is dispersed over
lactose. The mixture is air dried and passed through a 0.42 mm mesh sieve. The mixture is then granulated with isopropyl alcohol, spread on trays and dried at 49 [deg.] C for 16 hours.
The dried granulated product is then sieved. We mix the granules vigorously
<EMI ID = 114.1>
The active ingredient in the preparation of tablet B is treated identically to that of tablet A until drying at 49 [deg.] C for
16 hours. The dried granules are then sieved and vigorously mixed with magnesium stearate and the mixture pressed into tablets.
CAPSULE A
<EMI ID = 115.1>
<EMI ID = 116.1>
<EMI ID = 117.1>
: 5 The active ingredient of capsule A or B is mixed vigorously
with corn starch and lactose, pass through a 0.44 mm sieve and mix again. Talc is added and the mixture is vigorously mixed and filled into suitable hard gelatin capsules by hand or machine
<EMI ID = 118.1>
<EMI ID = 119.1>
formulations of this type that may be mentioned are sugars such as lactose, sucrose, mannitol or sorbitol; starches such as mars, tapioca or potato starch; cellulose derivatives such as sodium carboxymethylcellulose, ethylcellulose or methylcellulose, gelatin, sodium phosphates
Calcium such as dicalcium or tricalcium phosphate, sodium sulfate,
calcium sulfate, polyvinyl pyrrolidone, polyvinyl alcohol, stearic acids, alkaline earth metal stearates such as magnesium stearate; vegetable oils containing stearic acid, such as
as peanut oil, cottonseed oil, sesame oil, olive oil, mars oil; surfactants (nonionic, cationic or anionic), polymers of ethylene glycol, α � -cyclodextrin, fatty alcohols, hydrolyzed cereal solids, as well as other chargea, binders, disintegrants, lubricants compatible non-toxic commonly used in pharmaceutical formultations.
In compositions of the type described above, the new compounds of formula are present in an amount suitable for producing the desired effect. Although an amount of about 100 to 250 mg per unit dose is convenient, much more or more can be incorporated if desired.
<EMI ID = 120.1>
The extent of these compounds depends on various factors such as the particular compound used, the condition for which it is administered, and the individual response of the patient. Typical doses for use as
<EMI ID = 121.1>
