<EMI ID=1.1>
tion en thérapeutique de composes hétérocycliques bicycliques condensés comme tranquillisants et sédatifs.
L'invention concerne plus particulièrement l'application en thérapeutique , comme tranquillisants et sédatifs, des composés hétérocycliques bicycliques
<EMI ID=2.1>
<EMI ID=3.1>
dans laquelle
X représente un atome de soufre ou un groupe imino, n signifie 1 ou 2,
R. représente un atome d'hydrogène ou d'halogène, un
groupe alkyle,, alkylthio ou alcoxy contenant chacun de 1 à 4 atomes de carbone ou un groupe trifluorométhyle ou hydroxy,
A représente un hêtérocycle à 5 chaînons contenant
au moins un hêtêroatome choisi parmi l' azote, . l'oxygène et le soufre et possédant 2 atomes de carbone adjacents en commun avec le cycle benzénique, le cycle A ne pouvant toutefois pas représenter, avec le cycle benzénique auquel il est condensé, le benzo-2,l,3-thiadiazole, et
<EMI ID=4.1>
<EMI ID=5.1>
R2 étant lié à un atome de carbone du cycle A et
signifiant un atome d'hydrogène ou d'halogène
ou un groupe alkyle, alcoxy ou alkylthio contenant chacun de 1 à 4 atomes de carbone, ou un groupe trifluoromêthyle ou hydroxy, et
R3 étant fixé sur un atome d'azote du cycle A et signifiant un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle contenant' "de 1 -IL atomes décagone/avec la condition que
<EMI ID=6.1>
d'azote de ce pyrrole soit substitué par un groupe alkyle contenant de 1 à 4 atomes de carbone,
et des composés hétérocycliques bicycliques condensés
<EMI ID=7.1>
<EMI ID=8.1>
0
dans laquelle
<EMI ID=9.1>
<EMI ID=10.1>
<EMI ID=11.1>
indépendamment lès uns des autres, un atome d'hydrogène ou d'halogène, un groupe alkyle, alcoxy ou alkylthio contenant chacun de 1 à 4 atomes de carbone, ou un groupe cyano, hydroxy ou nitro, ou il) R' signifie un reste de formule III
<EMI ID=12.1>
dans laquelle
<EMI ID=13.1>
soit l'un des symboles A et B représente un reste =CH- et l'autre signifie un reste =N-,
<EMI ID=14.1>
de l'autre, un atome d'hydrogène ou d'halogène, un groupe alkyle, alcoxy ou alkylthio contenant chacun de ? 1 4 atomes de carbone, ou un groupe trifluoro. méthyle, cyano, nitro ou hydroxy, et
<EMI ID=15.1>
alkyle ou alcoxy contenant chacun de 1 à 4 atomes de carbone,
<EMI ID=16.1>
point de vue pharmaceutique ,
D'une manière générale, les composés
de formule 1 sont connus et décrits par exemple dans les demandes de brevets allemands 2 800 062, 2 653 005 et 2 416 024. Ces composes se signalent par différentes propriétés pharmacologiques, par exemple un effet myotono-'
<EMI ID=17.1>
signifie un reste de formule II sont également connus. Ils sont décrits dans le brevet des Etats-Unis 3 843 668 et dans la demande de brevet allemand 2 636 309. Ces composés exercent une action contre les tremblements
<EMI ID=18.1>
R' signifie un reste de formule III sont connus et décrits par exemple dans le.brevet britannique 1 381 979; ces composés font preuve d'une action antihypertensive.
En poursuivant ses recherches, la Demanderesse a trouvé maintenant que les composés de formule 1 et
de formule l'exercent une action tranquillisante et sédative.
Dans les composés de formule I, le cycle
A représente par exemple le [b] ou [c]pyrrole, le
<EMI ID=19.1>
[d]triazole, en particulier le [blfuranne'.
Les groupes alkyle, alcoxy ou alkylthio préférés sont ceux contenant 1 ou 2 atomes de carbone, en particulier 1 atome de carbone. Par halogène on entend le fluor,
le chlore, le brome ou l'iode, de préférence le brome ou le chlore.
<EMI ID=20.1>
cation autre que le groupe hydroxy; il représente en particulier un atome d'hydrogène ou de chlore ou
<EMI ID=21.1>
ortho par rapport au reste hétérocyclique-amino.
R2 représente de préférence un atome d'hydrogène ou d'halogène,en particulier un atome de chlore,
<EMI ID=22.1>
sente un groupe alkyle.
Le reste hétérocyclique-amino est situé de préférence en position 4 ou 7 du système bicyclique
<EMI ID=23.1>
<EMI ID=24.1>
préférence en position 3 du système bicyclique condensé. h signifie de préférence 1.
Comme exemples de composés de formule I, on
<EMI ID=25.1>
indazole, et le 4-chloro-5-(2-thiazoline-2-yl-àmino)indazole.
<EMI ID=26.1>
substituants contenant du carbone contiennent de préférence 1 atome de carbone. Par halogène, on entend le fluor, le chlore ou le brome.
<EMI ID=27.1>
<EMI ID=28.1>
les composés de formule l'a,
, (formule l'a voir page suivante)
<EMI ID=29.1>
<EMI ID=30.1>
chacun, indépendamment les uns des autres, un atome d'hydrogène ou d'halogène, un groupe alkyle, alcoxy ou alkylthio contenant chacun de 1 à 4 atomes de carbone, ou un groupe cyano, hydroxy ou nitro,
en particulier le 5-chloro-4-(2-imidazoline-2-yl-amino)- 2,1,3-benzothiadiazole.
Comme composés préférés de formule I' où
R' représente un reste de formule III; on peut citer
<EMI ID=31.1>
<EMI ID=32.1>
chacun l'hydrogène, par exemple la 5-bromo- ou 5-chloro6-(2-imidazoline-2-yl-amino)-quinolêine et -quinoxaline
<EMI ID=33.1>
zoline et -quinoléine.
L'action tranquillisante et sédative exercée
<EMI ID=34.1>
évidence par des essais effectués sur des animaux
et par des essais cliniques.
On a effectué des essais cliniques à double insu sur des patients souffrant de névroses avec des symptômes d'hypocondrie et accompagnées de désordres
<EMI ID=35.1>
orale pendant 14 jours une dose quotidienne de substance
<EMI ID=36.1>
<EMI ID=37.1> <EMI ID=38.1>
par Mehnert. Administrés par voie orale pendant 14
<EMI ID=39.1>
<EMI ID=40.1>
un effet tranquillisant significatif lorsqu'on se réfère à l'échelle des 20 symptômes de Mehnert.
L'action tranquillisante et sédative,exercée par
<EMI ID=41.1>
évidence chez la souris. On administre la substance
à essayer par voie orale à des groupes de 4 souris
que l'on place dans des cages éclairées par un faisceau de lumière rouge (Dispositif électronique de contrôle
de la motilité commercialisé par Motron, Stockholm, Suède). Un groupe de 4 souris, servant de témoin, est soumis au même essai mais les animaux reçoivent un placebo au lieu de la substance à essayer. On détermine la motilité des souris en comptant (par comptage électronique) le nombre de fois qu'elles interrompent le faisceau de lumière pendant 15 minutes sur une période de
60 minutes et on compare avec les animaux témoins. Administrés par voie orale à une dose comprise entre 0,01 et 0,1 mg/kg, les composés de formule I et les
<EMI ID=42.1>
quillisant et sédatif qui se traduit par une inhibition de la motilité des souris.
Par ailleurs, les composés de formules 1
<EMI ID=43.1>
ambivalent (une forme de comportement face à un conflit) et sur le comportement de contact social chez les animaux. Cette action exercée par les composés de formules 1 et
<EMI ID=44.1>
on administre la substance à essayer par voie orale à une souris mâle que l'On introduit ensuite pour
6 minutes dans la cage d'une souris mâle isolée et agressive, ayant l'habitude de cette cage. On analyse statistiquement le comportement de la souris introduite en procédant selon la méthode décrite par A.K. Dixon
et J.H. Mackintosh, Anim. Behav. 19, 138-140 (1971);
on se réfère aux différents types de comportement
cités par A.K. Dixon dans " Das Tier im Experiment" ("Rodent Social Behaviour in Relation to Biomedical Research"), Ed. W. Weihe, Hans Huber Verlag, Bern 1978, par exemple les comportements d'activité non-sociale, de recherche de société et dlaccouplement, le comportement agressif, et le comportement de défence ambivalente,
de fuite ou de retraite et d'alimentation. Administrés par voie orale à une dose comprise entre 0,1 et 1 mg/kg,
<EMI ID=45.1>
essai le comportement de défense ambivalent et augmentent le contact social chez la souris.
<EMI ID=46.1>
également une action sur les cycles veille/sommeil. Cette propriété a été mise en évidence chez le rat
<EMI ID=47.1>
dans European J. Pharmacol. 33, 159-163 (1975). Après administration par voie orale de la substance à essayer à une dose comprise entre 0,3 et 3 mg/kg, on a constaté dans cet-essai une augmentation de la somnolence. L'électro-encéphalogramme a été enregistré pendant une
période de 8 heures.
Grâce 2 ces propriétés, les composés de
<EMI ID=48.1>
utilisés en thérapeutique comme tranquillisants, par exemple pour le traitement des névroses. Ils seront prescrits à des doses quotidiennes comprises entre environ 0,25 et 16 mg de substance active qu'on adminis:0 -
trera avantageusement en plusieurs doses unitaires contenant chacune entre environ 0,125 et 8 mg
de substance active , à raison de 2 à 4 fois par jour.
Pour le 5-chloro-4-(2-imidazoline-2-yl -amino)2,1,3-benzothiadiazole, par exemple, la dose quotidienne a administrer sera avantageusement comprise entre
1 et 12 mg, de préférence entre 2 et 8 mg.
<EMI ID=49.1>
être administrés aussi bien � l'état de bases libres que sous formes de sels d'addition d'acides acceptables du point de vue pharmaceutique, par exemple sous forme de chlorhydrates; l'activité de ces sels est du même ordre que celle des bases libres correspondantes.
L'invention comprend également un médicament à action tranquillisante et sédative, caractérisé
en ce qu'il contient, à titre de principe actif,
<EMI ID=50.1>
libre ou sous forme d'un sel acceptable du point de vue pharmaceutique.
<EMI ID=51.1>
que leurs sels peuvent être utilisés comme médicaments, soit seuls, soit sous forme de compositions pharmaceutiques appropriées, par exemple sous forme de comprimés, de poudres, de granulés, de capsules, de suspensions,
de sirops ou d'ëlixirs pour l'administration par la voie orale, ou sous forme de solutions ou de suspensions injectables pour l'administration par la voie parenté-
<EMI ID=52.1>
ces compositions pharmaceutiques peuvent contenir des excipients minéraux ou organiques, inertes du point de-vue pharmaceutique, ainsi qu'éventuellement des agents de granulation, des liants, des lubrifiants, des agents de dispersion, des mouillants et des agents de conservation. Les compositions pharmaceutiques peuvent également contenir des colorants, des aromatisants, des, édulcorants etc.. Comme excipients, on pourra utiliser par exemple pour des comprimés :
du carbonate de calcium,- du lactose, de la cellulose microcristalline, du mannitol ou du talc, etc.., des agents de granulation et de désintégration, tels que l'amidon, l'acide alginique, la cellulose microcrista-
<EMI ID=53.1>
la gélatine; etc..., des lubrifiants tels que le stéarate de magnésium, l'acide stéarique, la silice colloïdale et le talc. Les comprimés peuvent être revêtus ou non. Le revêtement a pour but�entre autres,
de retarder la décomposition et l'absorption du principe actif dans le tractus gastro-intestinal et de produire ainsi un effet retard. De même, les suspensions, les sirops et les élixirs peuvent contenir, outre le principe actif, des agents de suspension tels que la méthyl-cellulose, la gomme adragante, l'alginate de sodium etc..., des mouillants tels que le stéarate de polyoxyéthylène et le mono-oléate de polyoxyéthylëne-sorbitane, et des agents de conservation tels que le p-hydroxy-benzoate
de méthyle, d'éthyle ou de propyle. Les capsules peuvent
<EMI ID=54.1>
mélange avec des excipients solides inertes comme par exemple le phosphate de calcium, l'amidon, le lactose, le mannitol, la silice colloïdale et la cellulose micro-cristalline.
Les formes médicamenteuses préférées sont les formes solides, en particulier les capsules et les comprimés.
L'invention comprend également un produit conditionné comprenant une composition pharmaceutique contenant un composé de formule I ou I' et les instructions nécessaires pour l'utilisation comme tranquillisant ou comme sédatif.
Les exemples suivants illustrent la présente invention sans aucunement en limiter la portée.
Exemple 1
Comprimés pour l'administration par voie orale
On prépare selon les méthodes habituelles des comprimes ayant la composition suivante:
<EMI ID=55.1>
* ce qui correspond à 1 mg de compose à l'état libre.
Ces composés peuvent être administrés
à raison de 2 comprimés 4 fois par jour. Les comprimés peuvent être munis d'une encoche de partage (comprimés
<EMI ID=56.1>
Capsules pour l'administration par voie orale
On prépare selon les méthodes habituelles des capsules ayant la composition suivante:
<EMI ID=57.1>
..-ce qui correspond à environ 1 mg de composé à l'état libre .Ces capsules peuvent être administrées à raison d'une capsule de 2 à 4 fois par jour.
Exemple 3
Solution stérile injectable
On prépare, selon les méthodes habituelles, une solution stérile injectable ayant la composition
<EMI ID=58.1>
scellées.
<EMI ID=59.1>
Système tampon : quantité nécessaire pour ajuster
le pH à 5 et obtenir une suspension stable
Eau distillée : quantité suffisante pour compléter à 1 ml
<EMI ID=60.1>
libre
<EMI ID=61.1>
par jour.
<EMI ID = 1.1>
tion in therapy of condensed heterocyclic bicyclic compounds as tranquilizers and sedatives.
The invention relates more particularly to the therapeutic application, as tranquilizers and sedatives, of bicyclic heterocyclic compounds
<EMI ID = 2.1>
<EMI ID = 3.1>
in which
X represents a sulfur atom or an imino group, n signifies 1 or 2,
R. represents a hydrogen or halogen atom, a
alkyl group, alkylthio or alkoxy each containing from 1 to 4 carbon atoms or a trifluoromethyl or hydroxy group,
A represents a 5-membered heterocycle containing
at least one heteroome chosen from nitrogen,. oxygen and sulfur and having 2 adjacent carbon atoms in common with the benzene ring, the ring A, however, not being able to represent, with the benzene ring to which it is condensed, benzo-2, l, 3-thiadiazole, and
<EMI ID = 4.1>
<EMI ID = 5.1>
R2 being linked to a ring A carbon atom and
meaning a hydrogen or halogen atom
or an alkyl, alkoxy or alkylthio group each containing from 1 to 4 carbon atoms, or a trifluoromethyl or hydroxy group, and
R3 being attached to a nitrogen atom of the ring A and signifying a hydrogen atom or an alkyl group containing '"of 1 -IL decagon atoms / with the condition that
<EMI ID = 6.1>
nitrogen of this pyrrole is substituted by an alkyl group containing from 1 to 4 carbon atoms,
and condensed bicyclic heterocyclic compounds
<EMI ID = 7.1>
<EMI ID = 8.1>
0
in which
<EMI ID = 9.1>
<EMI ID = 10.1>
<EMI ID = 11.1>
independently of one another, a hydrogen or halogen atom, an alkyl, alkoxy or alkylthio group each containing from 1 to 4 carbon atoms, or a cyano, hydroxy or nitro group, or it) R 'signifies a residue of formula III
<EMI ID = 12.1>
in which
<EMI ID = 13.1>
either one of the symbols A and B represents a remainder = CH- and the other signifies a remainder = N-,
<EMI ID = 14.1>
on the other, a hydrogen or halogen atom, an alkyl, alkoxy or alkylthio group each containing? 1 4 carbon atoms, or a trifluoro group. methyl, cyano, nitro or hydroxy, and
<EMI ID = 15.1>
alkyl or alkoxy each containing from 1 to 4 carbon atoms,
<EMI ID = 16.1>
pharmaceutical point of view,
Generally speaking, the compounds
of formula 1 are known and described for example in the German patent applications 2 800 062, 2 653 005 and 2 416 024. These compounds are distinguished by different pharmacological properties, for example a myotono- '
<EMI ID = 17.1>
means a residue of formula II are also known. They are described in US Patent 3,843,668 and in German Patent Application 2,636,309. These compounds have an action against tremors
<EMI ID = 18.1>
R 'signifies a residue of formula III are known and described for example in British patent 1,381,979; these compounds demonstrate an antihypertensive action.
By continuing its research, the Applicant has now found that the compounds of formula 1 and
formula exert a tranquilizing and sedative action.
In the compounds of formula I, the cycle
A represents for example the [b] or [c] pyrrole, the
<EMI ID = 19.1>
[d] triazole, in particular [blfuranne '.
The preferred alkyl, alkoxy or alkylthio groups are those containing 1 or 2 carbon atoms, in particular 1 carbon atom. By halogen is meant fluorine,
chlorine, bromine or iodine, preferably bromine or chlorine.
<EMI ID = 20.1>
cation other than hydroxy; it represents in particular a hydrogen or chlorine atom or
<EMI ID = 21.1>
ortho to the heterocyclic-amino residue.
R2 preferably represents a hydrogen or halogen atom, in particular a chlorine atom,
<EMI ID = 22.1>
has an alkyl group.
The heterocyclic-amino residue is preferably located in position 4 or 7 of the bicyclic system
<EMI ID = 23.1>
<EMI ID = 24.1>
preferably in position 3 of the condensed bicyclic system. h preferably means 1.
As examples of compounds of formula I, we
<EMI ID = 25.1>
indazole, and 4-chloro-5- (2-thiazoline-2-yl-àmino) indazole.
<EMI ID = 26.1>
carbon containing substituents preferably contain 1 carbon atom. Halogen means fluorine, chlorine or bromine.
<EMI ID = 27.1>
<EMI ID = 28.1>
the compounds of formula a,
, (formula see on next page)
<EMI ID = 29.1>
<EMI ID = 30.1>
each, independently of one another, a hydrogen or halogen atom, an alkyl, alkoxy or alkylthio group each containing from 1 to 4 carbon atoms, or a cyano, hydroxy or nitro group,
in particular 5-chloro-4- (2-imidazoline-2-yl-amino) - 2,1,3-benzothiadiazole.
As preferred compounds of formula I 'where
R 'represents a residue of formula III; we can cite
<EMI ID = 31.1>
<EMI ID = 32.1>
each hydrogen, for example 5-bromo- or 5-chloro6- (2-imidazoline-2-yl-amino) -quinoline and -quinoxaline
<EMI ID = 33.1>
zoline and -quinoline.
The tranquilizing and sedative action exerted
<EMI ID = 34.1>
evidence from animal tests
and through clinical trials.
Double-blind clinical trials have been performed on patients with neuroses with symptoms of hypochondria and accompanied by disorders
<EMI ID = 35.1>
oral for 14 days a daily dose of substance
<EMI ID = 36.1>
<EMI ID = 37.1> <EMI ID = 38.1>
by Mehnert. Orally administered for 14
<EMI ID = 39.1>
<EMI ID = 40.1>
a significant tranquilizing effect when reference is made to the Mehnert symptom scale.
The tranquilizing and sedative action, exerted by
<EMI ID = 41.1>
evidence in mice. We administer the substance
to try orally in groups of 4 mice
which are placed in cages lit by a beam of red light (Electronic control device
motility marketed by Motron, Stockholm, Sweden). A group of 4 mice, serving as a control, is subjected to the same test but the animals receive a placebo instead of the substance to be tested. The motility of the mice is determined by counting (by electronic counting) the number of times that they interrupt the beam of light for 15 minutes over a period of
60 minutes and compare with the control animals. Administered orally at a dose between 0.01 and 0.1 mg / kg, the compounds of formula I and
<EMI ID = 42.1>
quillisant and sedative which results in an inhibition of the motility of the mice.
Furthermore, the compounds of formulas 1
<EMI ID = 43.1>
ambivalent (a form of behavior in the face of conflict) and on social contact behavior in animals. This action exerted by the compounds of formulas 1 and
<EMI ID = 44.1>
the test substance is administered orally to a male mouse which is then introduced for
6 minutes in the cage of an isolated and aggressive male mouse, used to this cage. The behavior of the introduced mouse is statistically analyzed using the method described by A.K. Dixon.
and J.H. Mackintosh, Anim. Behav. 19, 138-140 (1971);
we refer to different types of behavior
cited by AK Dixon in "Das Tier im Experiment" ("Rodent Social Behavior in Relation to Biomedical Research"), Ed. W. Weihe, Hans Huber Verlag, Bern 1978, for example behaviors of non-social activity, research of society and mating, aggressive behavior, and ambivalent defensive behavior,
flight or retreat and feeding. Orally administered at a dose between 0.1 and 1 mg / kg,
<EMI ID = 45.1>
test ambivalent defense behavior and increase social contact in mice.
<EMI ID = 46.1>
also an action on the sleep / wake cycles. This property has been demonstrated in rats
<EMI ID = 47.1>
in European J. Pharmacol. 33, 159-163 (1975). After oral administration of the test substance at a dose between 0.3 and 3 mg / kg, it was found in this test an increase in drowsiness. The electroencephalogram was recorded during a
8 hour period.
Thanks to these two properties, the compounds of
<EMI ID = 48.1>
used in therapy as tranquilizers, for example for the treatment of neuroses. They will be prescribed in daily doses of between approximately 0.25 and 16 mg of active substance that are administered: 0 -
will advantageously be in several unit doses each containing between about 0.125 and 8 mg
active substance, 2 to 4 times a day.
For 5-chloro-4- (2-imidazoline-2-yl -amino) 2,1,3-benzothiadiazole, for example, the daily dose to be administered will advantageously be between
1 and 12 mg, preferably between 2 and 8 mg.
<EMI ID = 49.1>
be administered as well � the state of free bases only in the form of pharmaceutically acceptable acid addition salts, for example in the form of hydrochlorides; the activity of these salts is of the same order as that of the corresponding free bases.
The invention also includes a tranquilizing and sedating medicament, characterized
in that it contains, as an active ingredient,
<EMI ID = 50.1>
free or in the form of a pharmaceutically acceptable salt.
<EMI ID = 51.1>
their salts can be used as medicaments, either alone or in the form of suitable pharmaceutical compositions, for example in the form of tablets, powders, granules, capsules, suspensions,
syrups or elixirs for administration by the oral route, or in the form of solutions or injectable suspensions for administration by the parenteral route
<EMI ID = 52.1>
these pharmaceutical compositions can contain inorganic or organic excipients, inert from the pharmaceutical point of view, as well as optionally granulating agents, binders, lubricants, dispersing agents, wetting agents and preserving agents. The pharmaceutical compositions can also contain colorings, flavorings, sweeteners, etc. As excipients, it is possible to use, for example for tablets:
calcium carbonate, - lactose, microcrystalline cellulose, mannitol or talc, etc., granulating and disintegrating agents, such as starch, alginic acid, microcrystalline cellulose
<EMI ID = 53.1>
gelatin; etc ..., lubricants such as magnesium stearate, stearic acid, colloidal silica and talc. The tablets may or may not be coated. The purpose of the coating is, among other things,
delay the decomposition and absorption of the active ingredient in the gastrointestinal tract and thus produce a delayed effect. Similarly, suspensions, syrups and elixirs may contain, in addition to the active principle, suspending agents such as methyl cellulose, gum tragacanth, sodium alginate etc ..., wetting agents such as stearate polyoxyethylene and polyoxyethylene sorbitan mono-oleate, and preservatives such as p-hydroxy benzoate
methyl, ethyl or propyl. The capsules can
<EMI ID = 54.1>
mixture with inert solid excipients such as for example calcium phosphate, starch, lactose, mannitol, colloidal silica and microcrystalline cellulose.
Preferred drug forms are solid forms, particularly capsules and tablets.
The invention also includes a packaged product comprising a pharmaceutical composition containing a compound of formula I or I 'and the instructions necessary for use as a tranquilizer or as a sedative.
The following examples illustrate the present invention without in any way limiting its scope.
Example 1
Tablets for oral administration
Tablets having the following composition are prepared according to the usual methods:
<EMI ID = 55.1>
* which corresponds to 1 mg of compound in the free state.
These compounds can be administered
2 tablets 4 times a day. Tablets may have a sharing notch (tablets
<EMI ID = 56.1>
Capsules for oral administration
Capsules having the following composition are prepared according to the usual methods:
<EMI ID = 57.1>
..- which corresponds to approximately 1 mg of compound in the free state. These capsules can be administered at the rate of one capsule 2 to 4 times per day.
Example 3
Sterile solution for injection
A sterile injectable solution having the composition is prepared according to the usual methods
<EMI ID = 58.1>
sealed.
<EMI ID = 59.1>
Buffer system: amount needed to adjust
pH at 5 and obtain a stable suspension
Distilled water: enough to make up to 1 ml
<EMI ID = 60.1>
free
<EMI ID = 61.1>
per day.
